重磅!深圳首次揭秘滅活新冠病毒真實(shí)形貌:采用冷凍電子顯微鏡
3月6日消息 據(jù)深圳市第三人民醫(yī)院消息,近日,深圳國家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心/南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院(深圳市第三人民醫(yī)院)與南方科技大學(xué)聯(lián)合,從臨床新冠肺炎病例獲取生物樣本,首次使用冷凍電子顯微鏡觀察到新冠病毒經(jīng)滅活后的真實(shí)形貌,為新冠病毒的識別、鑒定和臨床相關(guān)研究提供重要的超微影像基礎(chǔ)。該成果于當(dāng)?shù)貢r(shí)間2020年3月5日發(fā)布在生物領(lǐng)域最大的預(yù)印本發(fā)行服務(wù)BioRxiv上。
(冷凍電子顯微鏡下看到的新冠病毒經(jīng)滅活后的真實(shí)形貌)
獲悉,冷凍電子顯微鏡是一種可以觀察被快速凍結(jié)到負(fù)196度“活”的蛋白、病毒等生物樣本的電子顯微鏡。近年來該技術(shù)快速應(yīng)用于病毒鑒定與疾病診斷、藥物開發(fā)、精準(zhǔn)醫(yī)療、腦科學(xué)研究、新材料、新農(nóng)業(yè)、海洋生物等眾多學(xué)科。
據(jù)介紹,聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)依托深圳市第三人民醫(yī)院生物安全I(xiàn)II級實(shí)驗(yàn)室條件,在2020年1月27日從1名新冠患者肺泡灌洗液中分離出病毒株,并迅速完成基因組測序和鑒定,及時(shí)向全球流感信息共享平臺(GISAID注冊編號:EPI_ISL_406594)注冊共享信息,把其命名為“BetaCoV/Shenzhen/SZTH-003/2020”的新冠毒株。隨后進(jìn)一步完善了實(shí)驗(yàn)室病毒擴(kuò)增、純化及滅活技術(shù),并綜合應(yīng)用間接免疫熒光法(IFA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、和基因組序列與譜系分析多種方案核實(shí)和確認(rèn)滅活的新冠病毒。
隨后南方科技大學(xué)冷凍電子顯微鏡中心的專家,利用冷凍電子顯微鏡分析技術(shù),不僅首次觀察到了真實(shí)的新冠病毒經(jīng)滅活后的形貌,并且捕捉到了該病毒侵染宿主細(xì)胞中的一個(gè)重要中間狀態(tài)。此時(shí)病毒正處于識別和附著宿主細(xì)胞后,準(zhǔn)備與細(xì)胞發(fā)生融合的時(shí)期。經(jīng)國內(nèi)外文獻(xiàn)檢索,這是新冠肺炎疫情爆發(fā)以來,科研工作者首次在冷凍電子顯微鏡下觀察到新冠病毒全病毒的真實(shí)形貌。
據(jù)了解,冷凍電子顯微鏡可以避免常溫電子顯微鏡對生物樣品的脫水、染色等破壞作用,最大限度地保持了生物樣品生理狀態(tài)下的真實(shí)形貌。聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)現(xiàn)正在進(jìn)一步揭示新冠病毒超微結(jié)構(gòu)、病毒侵染人類宿主細(xì)胞的特性、與新冠肺炎臨床預(yù)后關(guān)系。