中國(guó)團(tuán)隊(duì)發(fā)布全球首個(gè)新冠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果 專家：病毒還沒變異

疫苗對(duì)控制新冠肺炎的重要性已不言而喻，全球科學(xué)家們也都在為研發(fā)疫苗努力著。

最近，基于抗體的疫苗研究終于有了可喜的消息。

5月6日，中國(guó)科學(xué)家在國(guó)際頂級(jí)學(xué)術(shù)期刊《科學(xué)》（Science）上率先發(fā)表了新冠病毒疫苗的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

論文截圖

值得注意的是，這是全球首個(gè)詳細(xì)完整公布新冠疫苗動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果的論文，中國(guó)團(tuán)隊(duì)出品，并證明了小鼠、大鼠到恒河猴的驗(yàn)證—;—;均有效。而早在4月19日，該論文的預(yù)覽版就曾經(jīng)在生物科學(xué)論文平臺(tái)bioRxiv上進(jìn)行發(fā)布，并在業(yè)界引起了高度關(guān)注。

論文截圖

全球首個(gè)滅活疫苗

根據(jù)處理手段的不同，疫苗分為5種：滅活疫苗、減毒活疫苗、重組蛋白疫苗、核酸疫苗、重組病毒載體疫苗。

此次研究人員使用的就是較為傳統(tǒng)的滅活疫苗。

滅活疫苗，指的是把病毒直接殺死，然后將全尸扔給免疫系統(tǒng)讓它認(rèn)。比如加熱熱死，或者用福爾馬林泡死。這是最經(jīng)典的疫苗類型，優(yōu)點(diǎn)是安全成熟，缺點(diǎn)是病毒畢竟是死的，引起的免疫可能不夠。

主要研究方法是通過提取病毒毒株，滅活處理之后，注射進(jìn)小鼠、大鼠以及恒河猴上，在它們身上誘導(dǎo)出中和抗體。

那么，具體研究有哪些結(jié)果呢？

PICo疫苗可能能夠引起更有效的抗體反應(yīng)。

研究人員從11名住院患者（包括5名重癥監(jiān)護(hù)患者）的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中分離出SARS-CoV-2菌株，其中5名來自中國(guó)，3名來自意大利，1名來自瑞士，1名來自英國(guó)，1名來自西班牙。

這11個(gè)樣本包含SARS-CoV-2菌株，而這些菌株廣泛分布在從所有可用序列構(gòu)建的系統(tǒng)樹上，在一定程度上代表了循環(huán)的SARS-CoV-2種群。

為了做對(duì)比研究，研究人員選擇CN2株用于純化的滅活SARS-CoV-2病毒疫苗開發(fā)(PICo疫苗)和另外10株(稱為CN1、CN3-CN5和0S1-0S6)作為臨床前挑戰(zhàn)菌株。

為了評(píng)估PICo疫苗的免疫原性，在第0天和第7天注射各種劑量的PICo疫苗(每劑量0，1.5或3或6pg，生理鹽水中的0pg作為假組)=BALB/c小鼠(n10)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無炎癥或其他不良反應(yīng)。

讓研究人員更為驚喜的是，他們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)在免疫小鼠中，N特異性IgG誘導(dǎo)的數(shù)量比針對(duì)S或RBD的抗體低30fbld，研究人員也表示雖然這一觀察目前并不表明PICo疫苗在人類中產(chǎn)生類似結(jié)果的能力，但它突出了PICo疫苗誘導(dǎo)強(qiáng)烈和有效的免疫反應(yīng)的潛力。綜上，研究人員認(rèn)為，針對(duì)SARS-CoV-2N的抗體不能提供抗感染的保護(hù)性免疫，表明PICo疫苗可能能夠引起更有效的抗體反應(yīng)。

該疫苗是安全有效的

接下來，研究人員用微中和試驗(yàn)(MN50)測(cè)定了SARS-CoV-2特異性中和抗體在一段時(shí)間內(nèi)的含量..與S特異性IgG反應(yīng)相似，抗CN1菌株的中和抗體滴度出現(xiàn)在第1周（高劑量免疫12)，在第2周助推器后激增，低劑量和中劑量分別達(dá)到約1500，高劑量分別達(dá)到3000。

此外，對(duì)具有相同免疫策略的Wistar大鼠進(jìn)行PICo疫苗的免疫原性評(píng)價(jià)得出了類似的結(jié)果，對(duì)使用接種后3周收集的小鼠和大鼠血清對(duì)其他9株分離的SARS-CoV-2菌株進(jìn)行了中和試驗(yàn)后，研究人員發(fā)現(xiàn)PICo疫苗能夠激發(fā)抗體，這些抗體可能表現(xiàn)出對(duì)全世界流通的SARS-COV-2菌株的有效中和活性。

隨后研究者在疫苗免疫后的恒河猴中進(jìn)行了攻毒實(shí)驗(yàn)以評(píng)價(jià)疫苗免疫原性和保護(hù)效果。研究者在第0、7和14天給恒河猴接種不同劑量的疫苗，結(jié)果顯示，第2周可以誘導(dǎo)出S蛋白特異性的IgG和中和抗體，接種疫苗后第22天進(jìn)行攻毒。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，疫苗免疫后的恒河猴肺部組織病理變化顯著減小，病毒載量也顯著下降。高劑量組的恒河猴感染后的第7天，咽喉、肛門和肺部都未檢測(cè)到病毒，也沒有觀察到抗體依賴的增強(qiáng)現(xiàn)象。

為了進(jìn)一步證明研究結(jié)果，研究人員還通過觀測(cè)臨床指標(biāo)和生化指數(shù)驗(yàn)證了該疫苗的安全性，所有接種疫苗的恒河猴均未發(fā)現(xiàn)發(fā)燒和體重減輕現(xiàn)象，且食欲和精神狀態(tài)都保持正常。在第29天對(duì)肺、心、脾、肝、腎和腦在內(nèi)的各種器官組織的病理學(xué)評(píng)估表明，PiCoVacc也沒有引起顯著的病理學(xué)特征，以上結(jié)果表明了PiCoVacc在恒河猴中具有安全性。

還有隱憂

除了證明該疫苗是安全的，此次發(fā)表的研究還解答了人們對(duì)于接種新冠疫苗的另一個(gè)擔(dān)憂，即接種后是否會(huì)產(chǎn)生ADE效應(yīng)。

ADE效應(yīng)即抗體依賴性增強(qiáng)，指的是原本通過注射疫苗后應(yīng)當(dāng)形成抵抗病毒的抗體，因某些原因反而成為使病毒的感染性增強(qiáng)，成為病毒的“助攻”。

雷鋒網(wǎng)了解到，2019年，袁國(guó)勇教授團(tuán)隊(duì)曾發(fā)表一項(xiàng)使用中國(guó)獼猴進(jìn)行的SARS-CoV感染與疫苗嘗試的研究，該疫苗最終產(chǎn)生了ADE效應(yīng)，使用了疫苗的獼猴因感染而造成的肺部損傷比對(duì)照組更嚴(yán)重。

而近日發(fā)布的的動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果論文中明確表示，疫苗沒有觀察到ADE效應(yīng)。但也不能排除抗體滴度減弱后ADE表現(xiàn)的可能性。 所以，有必要進(jìn)行進(jìn)一步的研究，包括在疫苗接種后較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)觀察受挑戰(zhàn)的動(dòng)物。

不過，該研究團(tuán)隊(duì)也表示雖然目前仍不能確定相關(guān)研究中SARS-CoV-2感染的最佳動(dòng)物模型，但感染SARS-CoV-2后產(chǎn)生類新冠肺炎癥狀的恒河猴似乎是研究該病的較為適用的動(dòng)物模型，這些結(jié)果為臨床開發(fā)用于人類的SARS-CoV-2疫苗提供了一條道路。

需要注意的是，雖然秦川團(tuán)隊(duì)的疫苗研究，目前才對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的完整數(shù)據(jù)和結(jié)果，以論文的方式進(jìn)行公布，實(shí)際上該疫苗的研發(fā)進(jìn)度也早已步入了臨床研究階段。

專家怎么看？

早在4月19日預(yù)覽版論文發(fā)布時(shí)，就引起了業(yè)界的高度關(guān)注，專家學(xué)者們也表達(dá)了自己的看法。

西奈山伊坎醫(yī)學(xué)院的病毒學(xué)專家FlorianKrammer表示很喜歡這個(gè)研究的數(shù)據(jù)，他認(rèn)為傳統(tǒng)的方法雖不新穎，但可以起效。許多不是太發(fā)達(dá)的國(guó)家，也依舊可以制造疫苗。

但匹茲堡大學(xué)的DouglasReed教授則指出：該研究的動(dòng)物數(shù)量太少，不足以看到統(tǒng)計(jì)顯著的區(qū)別。另外，在感染新冠病毒后，猴子出現(xiàn)的癥狀一般比人類更輕，因此無法完全模擬人類感染的情況。

俄勒岡健康與科學(xué)大學(xué)的免疫學(xué)家馬克·斯利夫卡在也推特上寫道:“這提供了強(qiáng)有力的證據(jù)，證明這種病毒沒有發(fā)生變異，不會(huì)對(duì)#COVID19疫苗產(chǎn)生耐藥性。這是可喜的消息”。

雖然目前抗擊新冠，還沒有在疫苗方面取得絕對(duì)性的反擊轉(zhuǎn)折點(diǎn)，但全球所有的科研人員都在為此努力，我們只需要耐心一點(diǎn)等待更多好消息出現(xiàn)，畢竟，打不倒我們的，終將使我們強(qiáng)大。

期待疫苗能早日投入臨床使用！