電子顯微鏡的新貴智能電鏡初出茅廬 它的作用是什么
新型工業(yè)掃描電鏡受到越來(lái)越多的重視,高分辨率數(shù)據(jù)有海量需求,特別是材料和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。 然而長(zhǎng)期以來(lái),電鏡的潛在問(wèn)題---用戶使用操作繁雜的問(wèn)題尚未解開(kāi),一定程度上影響了儀器的普及推廣。
本文介紹工業(yè)掃描電鏡的新貴——智能電鏡。著重描述其多重的自動(dòng)化功能。智能目的是讓電鏡成為科研和工程上得心應(yīng)手的利器,發(fā)揮工具的作用。
新年伊始,國(guó)產(chǎn)新型掃描電鏡如黑馬騰空而起,超高速性能達(dá)到前所未聞的新高度。掃描電鏡成像速率實(shí)現(xiàn)雙通道100M像素/秒。即代表表面形貌的二次電子(SE)和代表成分信息的背散射電子(BSE)同步成像,達(dá)到2x100M像素/秒。以單通道舉例而言,產(chǎn)生某一幅可辨認(rèn)的生物組織BSE模式圖像約花260ms。 同樣條件下,國(guó)外某知名品牌同檔機(jī)型需花26000ms,國(guó)產(chǎn)掃描電鏡成像速度快了一百倍。
2x200幀/秒@512x512的高速攝像能力, 或2x60幀/秒@1024x1024即兩倍于視頻高清成像,可實(shí)現(xiàn)捕捉動(dòng)態(tài)過(guò)程。在1.2秒內(nèi)雙通道大范圍高清成像,對(duì)觀測(cè)一覽無(wú)遺。電鏡一天可自動(dòng)采集產(chǎn)生2 至 8TB數(shù)據(jù)量。方便地構(gòu)建全景“地圖”集,沒(méi)有懸念。超微結(jié)構(gòu)的三維重構(gòu)成為可能。
快速生成清晰圖像是掃描電鏡的精髓。在最佳工作距離條件下, 新型電鏡分辨率可達(dá)1.0nm@10kV或 1.5nm@1kV。隨之而來(lái)的是老問(wèn)題:如何方便地調(diào)試操作和維護(hù)電鏡? 這便是智能電鏡的由來(lái)。
什么是智能電鏡?開(kāi)發(fā)智能電鏡的初衷是突破傳統(tǒng)觀念,打消使用誤區(qū),提供簡(jiǎn)便環(huán)境,實(shí)現(xiàn)無(wú)人操作。智能電鏡功能模塊示意圖如圖一所示。具體而言,不妨用“五個(gè)自動(dòng)”功能來(lái)概括, 即自動(dòng)巡檢、自動(dòng)進(jìn)料、自動(dòng)對(duì)中、自動(dòng)對(duì)焦、自動(dòng)操作。
圖一 智能電鏡功能模塊示意圖
一.自動(dòng)巡檢工業(yè)掃描電鏡的電子光學(xué)系統(tǒng)主要由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈組成。電子束由電子源發(fā)出,熱場(chǎng)發(fā)射電子槍保證有足夠的初始電子發(fā)射到樣品上。加速電壓設(shè)在0.1 - 12kV范圍。加速電壓越高,電子速度越快,焦距就越長(zhǎng),景深也越大。
電磁透鏡的磁場(chǎng)作用力不改變電子運(yùn)動(dòng)的速度,只改變電子運(yùn)動(dòng)方向。高速的靜電偏轉(zhuǎn)器置于物鏡內(nèi),不僅結(jié)構(gòu)緊湊,而且保證大掃描場(chǎng)觀察時(shí)邊緣的象差較小,以達(dá)到圖像高分辨率。 偏轉(zhuǎn)器控制光束聚焦在樣品上快速掃描。探測(cè)器收集二次電子和背散射電子等信號(hào)。經(jīng)過(guò)放大后進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,便可得到電子圖像信息。
電鏡系統(tǒng)開(kāi)機(jī)自檢。巡查之后隨即進(jìn)入工作狀態(tài)。一反以往從上至下反復(fù)調(diào)整的過(guò)程。電鏡觀察前光學(xué)導(dǎo)航模塊會(huì)自動(dòng)地定位、尋地和導(dǎo)航,免去耗費(fèi)大量人工在鏡前尋找觀察區(qū)域,將工程人員從繁鎖的調(diào)試中解放出來(lái)。系統(tǒng)內(nèi)置定期全面自檢,將電子光學(xué)系統(tǒng)調(diào)節(jié)到連續(xù)運(yùn)作最佳狀態(tài)。
自動(dòng)巡檢離不開(kāi)支撐系統(tǒng)的穩(wěn)定體系。發(fā)射源的穩(wěn)定起著首要作用。 一周發(fā)射電流波動(dòng) 一周發(fā)射電流波動(dòng)《1%,保障了基本性能。
二.自動(dòng)進(jìn)料制備技術(shù)與電鏡緊密配合,大量的樣本在電鏡中連續(xù)觀察,是提高工作效率的關(guān)鍵之一。 以生物樣品為例,要觀察的生物樣本塊要經(jīng)過(guò)環(huán)氧包埋等樣品處理,使其變硬好切,之后在切片機(jī)上被切成幾十納米的薄片。切后的薄片落入收集水槽中被傳送帶捕獲,順次以條帶排列被收集在圓硅片上面。圓硅片上可以平整的收集幾十片乃至上百片樣品,然后承載樣品傳送入電鏡樣品臺(tái),一次性進(jìn)行大量樣本的觀察。
10余厘米邊長(zhǎng)的見(jiàn)方樣品臺(tái)沿著X軸和Y軸精密導(dǎo)軌行程自由位移。樣品重復(fù)定位精度達(dá)200nm。這就避免了每次重調(diào)位置的必要性。
電鏡成像要實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化,還需要制備技術(shù)同步跟上。制備與電鏡的無(wú)縫銜接,樣品直接切片收集,必要時(shí)可采用條帶或卷盤(pán)機(jī)方式自動(dòng)傳送進(jìn)入電鏡。