分光光度計的使用

在下述的內(nèi)容中，小編將會對分光光度計的相關(guān)消息予以報道，如果分光光度計是您想要了解的焦點之一，不妨和小編共同閱讀這篇文章哦。

一、什么是分光光度計

分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：(1)200～380nm的紫外光區(qū)，(2)380～780nm的可見光區(qū)，(3)2.5～25μm(按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度，所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進行校正檢定。

二、分光光度計的使用

1.堅持標(biāo)準溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，不使用過期標(biāo)準液。

使用儀器之前，一般要校正儀器，看看空白時透光率是否是100%。

2.比色皿應(yīng)該保持清潔，干燥。

如有污物，可用稀鹽酸清洗后，再用1：1的酒精與乙醚清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面?；蛘呓ㄗh使用10%的鹽酸溶液浸泡，然后用無水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性，使用時要注意，仔細觀察比色皿上方應(yīng)該有一個箭頭標(biāo)志的，代表入射光方向。注入和倒出溶液時，應(yīng)該選擇非透光面。最好使用配對的比色皿。

3.防止儀器振動，影響光學(xué)系統(tǒng)。

4.在開機狀態(tài)，不測量時，應(yīng)該打開樣品池門，否則，影響光電傳感器壽命。

5.樣品集中測量，避免開機次數(shù)，可延長光源壽命。

6.儀器工作穩(wěn)定性差，漂移大時，應(yīng)該考慮更換光源或光電元件。

7. 一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測器三的部分，光路有的情況是穩(wěn)壓電源問題，鎢燈問題及鎢燈位置與光路不一致等問題。光路部分主要有比色皿不干凈，燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下，比色皿位置放一張白紙，可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形，屬于正常情況。對于檢測器大多數(shù)是正常的，但是光敏管或者光電管有時侯也會出現(xiàn)問題。

8.若峰出現(xiàn)很多“毛刺”，可能是掃描速度過快，濃度過高或者狹縫過小;

9. 紫外分光光度計用來測紫外光時,石英皿用來調(diào)零時不穩(wěn)定,是由那些原因?

首先確定是否用成玻璃比色皿,判斷方法在紫外區(qū)任一波長下用空氣調(diào)零測比色皿的吸光度如果超過1ABS則比色皿用錯.再次用空氣調(diào)零看零點是否穩(wěn)定,如不穩(wěn)則是儀器問題,如空氣穩(wěn)定而放入石英皿后不穩(wěn)定,則檢查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液藥品過期,或者空白溶液透明范圍不適合此波長測量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無法調(diào)零。

10. 儀器狹縫寬度的選擇

狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時，入射光的單色光降低，校準曲線偏離比耳定律，靈敏度降低;狹縫寬度過窄時，光強變?nèi)?，勢必要提高儀器的增益，隨之而來的是儀器噪聲增大，于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是：測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內(nèi)，吸光度是不變的，當(dāng)狹縫寬度大到某一程度時，吸光度開始減小。因此，在不減小吸光度時的最大狹縫寬度，即是所欲選取的合適的狹縫寬度。

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