引言
在醫(yī)學檢驗中,體內多類激素水平及其微量代謝產(chǎn)物、藥物及代謝產(chǎn)物、維生素類及疾病相關抗原的分析測定總計可達幾十至上百種之多。但由于其檢測靈敏度要求較高,一般免疫技術難以達到。因此,長期以來一直沿用放射免疫法。
放射免疫法不僅對操作人員的健康造成了危害,而且其廢棄物對環(huán)境也有嚴重的污染。因此需要特殊的防護及廢物處理系統(tǒng),同時由于受到自然衰變的限制,其試劑不便長期儲存和運輸,因而大大地限制了它的發(fā)展。EIA 技術穩(wěn)定,試劑價格合理,酶免技術在中國市場處于成長期,開發(fā)一種應用酶免技術用于臨床檢測的儀器很有必要。
AD1674是美國AD公司推出的一種完整的12位并行模/數(shù)轉換單片集成電路。該芯片內部自帶采樣保持器(SHA)、10伏基準電壓源、時鐘源以及可和微處理器總線直接接口的暫存/三態(tài)輸出緩沖器。
AD1674的基本特點和參數(shù)如下:
帶有內部采樣保持的完全12位逐次逼近(SAR)型模/數(shù)轉換器;
采樣頻率為100kHz;轉換時間為10μs;
具有±1/2LSB的積分非線性(INL)以及12位無漏碼的差分非線性(DNL);
滿量程校準誤差為0.125%;
內有+10V基準電源,也可使用外部基準源;
四種單極或雙極電壓輸入范圍分別為±5V,±10V,0V~10V和0V~20V;
數(shù)據(jù)可并行輸出,采用8/12位可選微處理器總線接口;
內部帶有防靜電保護裝置(ESD),放電耐壓值可達4000V;
采用雙電源供電:模擬部分為±12V/±15V,數(shù)字部分為+5V。
內部結構
AD1674的引腳按功能可分為邏輯控制端口、并行數(shù)據(jù)輸出端口、模擬信號輸入端口和電源端口四種類型。圖1所示為AD1674的內部結構框圖。
AD1674的工作模式可分為全控(Full-Control)模式和獨立(Stand-Alone)模式,獨立模式主要用于具有專門輸入端系統(tǒng),因而不需要有全總線的接口能力。而采用全控工作模式則有利于和CPU進行總線連接。
光子計數(shù)儀設計
總體方案設計
基于儀器整體安裝及可維護性的考慮,儀器采用整體形式。包括對儀器的控制,鍵盤操作及顯示,儀器的傳動部分及硅光電池檢測部分。采用96微孔板作為測量載體;為增強測量的定位準確度,運行的平穩(wěn)性,光電檢測系統(tǒng)以固定方式檢測樣品,送樣機構可按要求進行Y方向及X方向順序運動。
采用可視性強的液晶顯示器,可顯示儀器當前所處狀態(tài)及每孔測量結果。定義20種可選擇的測量時間,可對微孔板的任意行數(shù)定義測量,數(shù)據(jù)輸出采用外接打印機。原始數(shù)據(jù)可在主機獨立測量完畢后由打印機輸出。計算機控制測量可完全替代單機測量的功能,同時可在WINDOWS的操作軟件包下進行樣品區(qū)、標準區(qū)、陰陽性孔位定義、測量及數(shù)據(jù)處理。
組件構思
采用日產(chǎn)硅光電池作為酶標儀檢測裝置的核心部分。傳動系統(tǒng)采用國際流行、運行平穩(wěn)、定位準確的齒杠、齒輪傳動與同步帶、齒輪傳動相結合的形式,送樣器(孔板托盤)、光電檢測裝置在開機后及測量完畢均定位在初始位置;送樣器及光電檢測裝置的傳采用日產(chǎn)硅光電池作為酶標儀檢測裝置的核心部分。
傳動系統(tǒng)采用國際流行、運行平穩(wěn)、定位準確的齒杠、齒輪傳動與同步帶、齒輪傳動相結合的形式,送樣器(孔板托盤)、光電檢測裝置在開機后及測量完畢均定位在初始位置;送樣器及光電檢測裝置的傳動系統(tǒng)采取互相垂直的獨立運動機構;采用MGL(S)24064帶背景光綠色顯示屏的顯示器; 89C55單片微機控制;外接中文打印機,和微機通過RS232通訊。 計算機數(shù)據(jù)處理軟件包,控制功能完全可在計算機上完成。具體電路原理框圖如圖2?! ?/p>
測量原理
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光, 400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。測量程序流程如圖3所示。
檢測單位:
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。檢測單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關系:
E=OD=logΙ0/Ι
其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算:
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。
但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
Anthos 酶標儀檢測值計算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,轉換成二進位數(shù)字信號,最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%,沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中,檢測物的透光值均在 0%~100%之間。透光值的計算如下:
T=(Meas—Min)/(Max—Min)
其中T為透光值, Meas為檢測的二進位數(shù)值, Min為在 0%的情況下檢測的二進位數(shù)值, Max為在100%的情況下檢測的二進位數(shù)值,舉例如下:
Max=3600
Min=20 Meas=30
T=(30-20)/(3600-20)=0.0028
OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552
軟件設計
設置軟件陷阱
當程序進入到非程序區(qū),只要在非程序區(qū)設置攔截措施,使程序進入陷阱,然后強迫程序回到初始狀態(tài)。如對CPU的RST指令對應的字節(jié)碼為0FFH,如果不用的程序存儲區(qū)預先寫入0FFH,則當程序因干擾而“飛”到該區(qū)域執(zhí)行代碼時,就相當于執(zhí)行1條RST指令,從而達到系統(tǒng)復位的目的。96孔測量程序流程如圖(3)。
結語
整機無論從結構到電器性能都達到了設計要求,采用的原理科學,技術及關鍵器件先進。通過一段時間的使用,從各用戶中反饋的信息都很滿意。該樣機從主機到應用軟件符合國際設計潮流及臨床操作要求。
參考文獻:
1. 朱根娣,臨床常用檢驗儀器——原理.結構.維護,上??茖W技術文獻出版社,2002
2. 美國Anglog Devices公司的AD1674 datasheet
3. 哈爾濱思創(chuàng)生物酶標儀使用說明書
4. 梁立森,CF-ZS系列板式酶標儀在市場競爭中發(fā)展,航天技術與民品1998年第1期