分光光度計(jì)的使用

在下述的內(nèi)容中，小編將會(huì)對(duì)分光光度計(jì)的相關(guān)消息予以報(bào)道，如果分光光度計(jì)是您想要了解的焦點(diǎn)之一，不妨和小編共同閱讀這篇文章哦。

一、什么是分光光度計(jì)

分光光度計(jì)，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源。

分光光度法是在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。常用的波長(zhǎng)范圍為：(1)200～380nm的紫外光區(qū)，(2)380～780nm的可見(jiàn)光區(qū)，(3)2.5～25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>～400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。

二、分光光度計(jì)的使用

1.堅(jiān)持標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，不使用過(guò)期標(biāo)準(zhǔn)液。

使用儀器之前，一般要校正儀器，看看空白時(shí)透光率是否是100%。

2.比色皿應(yīng)該保持清潔，干燥。

如有污物，可用稀鹽酸清洗后，再用1：1的酒精與乙醚清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面。或者建議使用10%的鹽酸溶液浸泡，然后用無(wú)水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性，使用時(shí)要注意，仔細(xì)觀察比色皿上方應(yīng)該有一個(gè)箭頭標(biāo)志的，代表入射光方向。注入和倒出溶液時(shí)，應(yīng)該選擇非透光面。最好使用配對(duì)的比色皿。

3.防止儀器振動(dòng)，影響光學(xué)系統(tǒng)。

4.在開(kāi)機(jī)狀態(tài)，不測(cè)量時(shí)，應(yīng)該打開(kāi)樣品池門(mén)，否則，影響光電傳感器壽命。

5.樣品集中測(cè)量，避免開(kāi)機(jī)次數(shù)，可延長(zhǎng)光源壽命。

6.儀器工作穩(wěn)定性差，漂移大時(shí)，應(yīng)該考慮更換光源或光電元件。

7. 一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測(cè)器三的部分，光路有的情況是穩(wěn)壓電源問(wèn)題，鎢燈問(wèn)題及鎢燈位置與光路不一致等問(wèn)題。光路部分主要有比色皿不干凈，燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下，比色皿位置放一張白紙，可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形，屬于正常情況。對(duì)于檢測(cè)器大多數(shù)是正常的，但是光敏管或者光電管有時(shí)侯也會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題。

8.若峰出現(xiàn)很多“毛刺”，可能是掃描速度過(guò)快，濃度過(guò)高或者狹縫過(guò)小;

9. 紫外分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)紫外光時(shí),石英皿用來(lái)調(diào)零時(shí)不穩(wěn)定,是由那些原因?

首先確定是否用成玻璃比色皿,判斷方法在紫外區(qū)任一波長(zhǎng)下用空氣調(diào)零測(cè)比色皿的吸光度如果超過(guò)1ABS則比色皿用錯(cuò).再次用空氣調(diào)零看零點(diǎn)是否穩(wěn)定,如不穩(wěn)則是儀器問(wèn)題,如空氣穩(wěn)定而放入石英皿后不穩(wěn)定,則檢查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液藥品過(guò)期,或者空白溶液透明范圍不適合此波長(zhǎng)測(cè)量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無(wú)法調(diào)零。

10. 儀器狹縫寬度的選擇

狹縫的寬度會(huì)直接影響到測(cè)定的靈敏度和校準(zhǔn)曲線的線性范圍。狹縫寬度過(guò)大時(shí)，入射光的單色光降低，校準(zhǔn)曲線偏離比耳定律，靈敏度降低;狹縫寬度過(guò)窄時(shí)，光強(qiáng)變?nèi)酰瑒?shì)必要提高儀器的增益，隨之而來(lái)的是儀器噪聲增大，于測(cè)量不利。選擇狹縫寬度的方法是：測(cè)量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個(gè)范圍內(nèi)，吸光度是不變的，當(dāng)狹縫寬度大到某一程度時(shí)，吸光度開(kāi)始減小。因此，在不減小吸光度時(shí)的最大狹縫寬度，即是所欲選取的合適的狹縫寬度。

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