流式細(xì)胞分析技術(shù)在現(xiàn)代細(xì)胞分子生物學(xué)研究中起著越來越重要的作用，這種分析技術(shù)是通過對單個細(xì)胞性狀的快速測定，并結(jié)合先進(jìn)的計算機(jī)分析系統(tǒng)，使得在短時間內(nèi)可對大量細(xì)胞進(jìn)行定性、定量測定。但以往進(jìn)行流式細(xì)胞儀操作和分析需要技術(shù)熟練的研究團(tuán)隊，而且這一設(shè)備價值也不菲——起碼也要10萬美元，有些甚至達(dá)到50萬美元，這對于許多實(shí)驗室來說并不容易負(fù)擔(dān)。
近年來一些主流生物技術(shù)企業(yè)相繼推出了新型流式細(xì)胞儀，讓這一技術(shù)變得更加容易操作，也更加實(shí)惠了。目前的流式細(xì)胞儀分析系統(tǒng)設(shè)置大部分都是自動化的，相關(guān)試劑盒也經(jīng)過了多次驗證，簡化了操作，降低了入門門檻。一些大型的公司，比如Sony和BD加大了研發(fā)力度，開發(fā)出了10萬美元以下的流式細(xì)胞儀，客戶群由中心實(shí)驗室轉(zhuǎn)向了個體研究人員。但是這些新型的流式細(xì)胞儀也不是說就能立即上手的，用戶在購買之前要弄清楚這一技術(shù)到底能做什么，不能做什么，有時實(shí)驗室購買了流式細(xì)胞儀后覺得又不適用了，這樣即浪費(fèi)資源，也耽誤時間，因此了解自己需要什么，了解不同儀器的優(yōu)缺點(diǎn)十分重要。以下是目前市面上較受關(guān)注的幾個新型流式細(xì)胞儀，通過分析它們的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，也許您在選購的時候就更有目的性了。
Attune Acoustic Focusing Cytometer
這是一款由美國能源部國家實(shí)驗室（洛斯阿拉莫斯國家實(shí)驗室）研制的新型流式細(xì)胞分析儀，去年春天由ABI（Life Technologies）公司投入到了市場，是市場上第一臺用聲波精確控制細(xì)胞移動的流式細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)，榮獲了2010年生物通生命科學(xué)十大創(chuàng)新產(chǎn)品稱號，以及The Scientist雜志2010十大創(chuàng)新技術(shù)稱號。
流式細(xì)胞儀的原理在于讓細(xì)胞穿過激光檢測設(shè)備，從而使科學(xué)家們得以對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和檢測，這一儀器的技術(shù)關(guān)鍵在于其靈敏分辨率和樣品進(jìn)樣分析速度，在此之前，研究人員必須在兩者之間二選一，取其平衡點(diǎn)，而Attune聲波聚焦原理的流式細(xì)胞儀的誕生解決了這個矛盾，研究人員能夠同時將速度和分辨率最大化，并在檢測點(diǎn)開展cell-by-cell的細(xì)胞分析。聲波聚焦的使用也增加了樣品量，達(dá)到1mL/分鐘，而目前市場上最快的傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀也只有160 μL/分鐘，這讓用戶能更有效地分析相對稀釋的樣品，比如干細(xì)胞，因為樣品中的顆粒能在檢測點(diǎn)濃縮。另外Attune聲波聚焦流式細(xì)胞儀是405nm紫色激光和488nm藍(lán)色雙激光設(shè)計，其中紫色激光要比其它一些經(jīng)濟(jì)型流式細(xì)胞儀中用到的標(biāo)準(zhǔn)激光馬力更大，目前Life Technologies也針對這一儀器推出了優(yōu)化探針，更有利于研究人員實(shí)驗操作。
Attune聲波聚焦流式細(xì)胞儀可幫助科學(xué)家們實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞群體中大量異質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)的采集，以便研究包括大小、復(fù)雜性、表型和健康情況在內(nèi)的細(xì)胞群體參數(shù)。Attune的專利技術(shù)可讓科學(xué)家們獲得更高的靈敏度，通過增加通量來節(jié)約時間，并可用于體積小的樣品。除此之外，Attune在提供這些升級性能的同時，還憑借緊湊的聲學(xué)技術(shù)而實(shí)現(xiàn)了體積小，以及開展實(shí)驗所需的消耗品量更少等優(yōu)勢。這些獨(dú)特的特征將有助于實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)細(xì)胞儀系統(tǒng)所無法實(shí)現(xiàn)的科研應(yīng)用，從樣品分離制備到微珠為基礎(chǔ)的樣品分析。但是也要注意的是，Attune聲波聚焦流式細(xì)胞儀并沒有安裝紅色激光——這是一些用戶比較喜歡的光源。而且在一些常用的流式細(xì)胞分析過程中，樣品都是高濃度，低體積的，如果用Attune，還要購買價格稍貴的tag，可能劃不來。
購買流式細(xì)胞儀注意事項：
明確目的：在購買流式細(xì)胞儀之前要考慮清楚自己的實(shí)驗?zāi)康?，這些新型流式細(xì)胞儀并不是萬能的，比如說如果想要檢測亞微分辨率的微粒，這些低端的儀器就都不合適。就熒光檢測而言，有研究人員就認(rèn)為這些經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的新型流式細(xì)胞儀在分辨模糊昏暗的細(xì)胞群體方面，不如那些貴一點(diǎn)的流式細(xì)胞儀，比如BD的FACSCanto II、BD LSR II，以及Beckman Coulter Gallios，假如您需要研究分析磷酸化受體和未磷酸化受體的話，可能就要重新考慮流式細(xì)胞儀的選擇了。
想想5年后的情況：要考慮清楚：需要分析多少樣品，進(jìn)行怎樣的實(shí)驗？預(yù)期的參數(shù)是多少？在未來的實(shí)驗中研究需求的數(shù)量和復(fù)雜性是否會增加？是否有可能升級到你想要的儀器？如果這些儀器不能滿足未來實(shí)驗的要求，也許還是應(yīng)該選擇在中心實(shí)驗室中進(jìn)行實(shí)驗。
費(fèi)用總計：進(jìn)行流式細(xì)胞實(shí)驗所需要的花費(fèi)并不僅僅是指花在試劑盒，過濾器，其它耗材上的錢，還有零件的更換，以及安裝這些零件花費(fèi)的時間。一臺EasyCyte流式細(xì)胞儀細(xì)心維護(hù)，半年也需要400美元，一些傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀更是要花費(fèi)上千。除此之外還有服務(wù)費(fèi)用。
儀器檢測：如果已經(jīng)下決心購買流式細(xì)胞儀了，那么可以聯(lián)系中心實(shí)驗室，詢問是否有這種儀器的演示實(shí)驗，一些中心實(shí)驗室都會召集一些研究人員在樣板機(jī)器中進(jìn)行常見的實(shí)驗操作，并分析這些結(jié)果與其它儀器結(jié)果的區(qū)別。如果不能到中心實(shí)驗室中檢測，那么可以在實(shí)驗室中自己檢測，看看機(jī)器的使用和維護(hù)情況。
自我培訓(xùn)：隨機(jī)一般都有軟件，但是這并不是說在實(shí)驗過程中，就不會把熒光背景當(dāng)作一個假陽性信號，因此研究人員還是需要花些時間進(jìn)行流式細(xì)胞分析培訓(xùn)的。有些免費(fèi)的在線課程，以及相關(guān)的各領(lǐng)域資料，比如干細(xì)胞生物學(xué)等，當(dāng)然更好的是能找到專家咨詢，許多研究機(jī)構(gòu)都有一些免費(fèi)的短期課程，大家可以多多留意。
下載文檔
